Có 2 lý do phổ biến dẫn đến trôi đường nền trong HPLC:
1-Detector mới bật, năng lượng đèn chưa ổn định nên tín hiệu tới ống nhân quang cũng giao động theo (đây là trường hợp detector UV). Tốt nhất nên chờ ít nhất 30 phút sau khi bật đèn, để máy ở chế độ preview, chờ đến khi đường nền hiển thị đã ổn định trong ít nhất 5 phút hãy bắt đầu tiêm mẫu.
2-Pha động qua cột chưa ổn định (nhất là trường hợp chạy pha động 2 thành phần hay nhiều hơn qua các kênh dung môi riêng biệt). Có thể đợi một thời gian hệ thống ổn định là đường nền sẽ phẳng.
Nếu không, tốt nhất nên trộn trước pha động, degass bằng siêu âm và chỉ chạy bằng 1 kênh duy nhất. Ngoài ra cũng nên kiểm tra bộ trộn dung môi (nếu van chuyển các kênh dung môi bị hỏng, hở, sẽ dẫn tới hiện tượng dung môi từ các kênh không sử dụng cũng bị bơm qua cột với tỷ lệ không ổn định, gây ra bất ổn về thành phần pha động, kết quả là đường nền không ổn định). Nếu do nguyên nhân này thì chỉ còn cách gọi service đến thay thôi.
Để giảm thiểu hiện tượng này nên rửa cẩn thận hệ thống HPLC trước và sau khi chạy, nhất là khi thay đổi dung môi, và khi sử dụng pha động có nồng độ đệm cao (chú ý nhất là đệm phosphat khi phối hợp với methanol, vì dễ có hiện tượng tủa dần trở lại).
|